南宋年間，當朝皇帝忽然病重昏迷，朝廷大亂，此時恰逢黑齒國國王黑泥來訪，十八太子龍兒只得代父設宴款待。席間，黑泥自夸黑齒國國力強盛，擁有武神、詩神、食神、棋神四大高手，龍兒暗自好笑，因為這四項正是漢人的強項，于是雙方當即決定一比高下，卻不料黑泥早已買通宋國四大高手，龍兒方知中了圈套，情急之下，龍兒與黑泥簽下契約：三月之后兩國比賽，宋國若輸則割地賠款。
一場精心設計而又不為人察覺的選拔在民間悄悄展開了，一番陰差陽錯之后，柳員外家的三個女子——從小愛舞刀弄槍的千金柳笑笑、愛棋如命的小妾十三姨、廚藝精湛的丫環(huán)百靈以及因逃婚而女扮男裝的冷秋月進入了龍兒的視線。
正當龍兒滿心歡喜邀她們進宮共襄大舉之際，四個女子卻被龍兒的叔叔趙王爺神秘劫走。原來趙王爺和黑泥早有勾結，欲謀反篡權，他慌稱太子荒淫無度，邀她們進宮只為納妾，并稱太子身上有七七四十九種怪病，嚇得笑笑等倉惶而逃。同時，他又慌報龍兒，稱四大高手無意為朝廷效命，故中途逃走。
龍兒決定帶親信“包打聽”小石頭微服私訪找回四大高手。而在趙王府，黑泥因不滿趙王爺放走四女，決定派兒子黑木搶在太子之前找到她們，一舉滅口。
笑笑、秋月、百靈和十三姨一路坎坷逃到揚州城，十三姨取出自己做歌妓時攢下的私房錢和笑笑等開了一家“姐妹客棧”以維持生計。不久，喬裝打扮的龍兒和黑木也先后找到了“姐妹客?！?，并成為客棧的伙計——“小龍”和“大黑”，
小石頭也因經常要通風報信，成為客棧的常客。
“姐妹客棧”漸漸好名遠揚，可卻麻煩不斷。巡撫大人的公子王俊才住進店內，原來他是為追尋逃婚的小妾冷秋月而來，并拿出秋月的賣身契相要挾。為幫助秋月逃脫魔爪，眾人決定利用王俊才好色的弱點，讓笑笑主動向王俊才示好，王俊才果然上當，乖乖地交出賣身契，笑笑見計劃得逞，當即撕碎賣身契，溜之大吉。王俊才因此懷恨在心，他收買了趕考書生李長安，伺機報復。
“姐妹客棧”眾人相處久了，率真的笑笑對智勇雙全的小龍漸生好感，而小龍卻暗戀嫻雅溫柔的秋月，于是笑笑只得求教于十三姨，十三姨自詡男人煞星，并答應向笑笑演示如何在十天內搏得一個男人的歡心，試驗的對象恰恰是李長安。果然十天后，被征服的不是李長安，而是十三姨自己，她決定賣掉“姐妹客?！焙屠铋L安私奔，最后當她得知一切都是陰謀時，終因不堪重擊而大病一場喪失了記憶。為幫助十三姨恢復記憶，笑笑連夜飛鴻喚來父親柳員外，無奈之中年邁的柳員外不得不對十三姨展開新一輪的追求。
之后，“姐妹客?！庇职l(fā)生了許多有趣而驚險的故事：百靈的身世之謎，笑笑捉鬼，十三姨智斗賭王，秋月和洋人的友情，百靈忽然喪失味覺……。在患難與 共中，大黑和小龍成為生死之交，秋月和大黑的愛情也日趨明朗，小龍終于發(fā)現一直暗戀自己的笑笑才是最適合自己的女孩，十三姨雖然沒有恢復記憶，卻被柳員外的真誠打動，第二次愛上了柳員外，而百靈也和“包打聽”小石頭成了一對。與此同時，趙王爺為鏟除心頭大患，早日謀反成功，借揚州大旱之際，設下“求雨”圈套，準備在除掉四女同時，一舉謀反，卻不料最后關頭天降大雨，笑笑等人險渡難關，趙王爺計劃全盤落空。而這時，小龍和大黑的身份也被揭穿，笑笑等終于弄清整個事件的來龍去脈。在黑木的妹妹黑珍珠的最后一次暗殺計劃也告失敗后，宋國與黑齒國約定的期限也終于到了。
比賽中，秋月、百靈、十三姨和柳笑笑齊心合力，憑借高超的技藝出奇制勝，經過一番智慧與意志的較量最終戰(zhàn)勝了對手。趙王爺眼看敗局已定，正欲刺殺龍兒，這時，昏迷多日的當朝皇帝突然出現在賽場，原來他早就覺察出趙親王的不軌之心，佯裝病重欲擒故縱，也借此考驗太子龍兒的能力，終于，趙親王等一批奸臣貪官受到了應有的懲罰。宋國與黑齒國也重修舊好。
不久以后，小龍和大黑不約而同向父親提出放棄太子的身份，做一個普通百姓，因為兩人深刻體會到在“姐妹客?！钡玫降男腋Ｒh勝于宮廷的浮華。至此，有情人終成眷屬，而“姐妹客?！钡墓适乱渤蔀榱私蠌V為流傳的佳話。
